Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的反复中逐渐扩展

从第一次显现出来胰脏自身特异性到显现出来1同型高血压医学副作用的困难重重率在老年人时代就有很差的详细描述，多个胰脏自身特异性特点性的老年人当中有70%在血液转换后10年内中风高血压，而随访15年的老年人这一总和减低到84%。相比之下，%医学1同型高血压一半以上的同型1同型高血压的患病机制还没有受益前提的研究者。

愈加多的人开始用于分期管理系统来假定1同型高血压的困难重重：个棒状在显现出来多种胰脏自身特异性时进入第1过渡阶段，显现出来血糖异常时进入第2过渡阶段，显现出来副作用时进入第3过渡阶段。一些多发胰脏自身特异性特点性的个棒状，在1期和2期，困难重重较慢，并发展为患病的1同型高血压。我们以后详细描述了一四组在首次扫描到多种胰脏自身特异性结果显示后至不及10年无高血压的极慢困难重重者，这四组病征总人数不及，但特点极为明确。随后，我们挖掘出胰脏自身肝细胞特异性CD8+T直通粒棒状质子化在困难重重减慢的病征当中前提不存在，但在未来会患病和长期存在的高血压病征当中很容易扫描到。这有可能说明，与困难重重病征相比，这些病征自身免疫质子化的恒定增强。

早期研究者说明，尽管恒定性T直通粒棒状(Treg)需求量也就是说，但高血压病征存在一些功用缺陷，其当中有数对IL-2的质子化控制能力减低。此外，高血压病征当中的效应CD4+T直通粒棒状有可能对恒定愈来愈具抵抗性，展现为效应T直通粒棒状的抑止增强，自然归因于的Treg和棒状外归因于的诱导Treg，以及肝细胞亲身经历的CD4+T直通粒棒状当中IL-2质子化增强。本研究者的旨在是详细描述了CD4+恒定性T直通粒棒状(Treg)在在在极减慢困难重重者当中的特点，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX研究者是一项以人群为基础的纵向研究者，在21岁以下发病的病征亲属当中安全检查1同型高血压的危险心理因素。我们以后详细描述了长期减慢困难重重者的特点，他们保持多重胰脏自身特异性特点性大约10年，但没有显现出来高血压的医学副作用，慢性或非完成性自身免疫。随后，10名继续保持无高血压并愿意给予大量血液结果显示的减慢困难重重者纳入T和B直通粒棒状功用管理系统性。在现今的研究者当中，8名慢困难重重者(SP四组)，当中位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁两者之间的胰脏自身特异性特点性。所有的自发性都西北面1同型高血压困难重重的1期，尽管一些人随后失掉了胰脏自身特异性对某些肝细胞的特点性质子化，然而，一名病征已经西北面2期至不及6年，但没有显现出来医学副作用，一名病征被临床为高血压，该受试者72岁，在采集检验结果显示时，其HbA1c下降到53 mmol/mol(7%)，在数据管理系统性当中对该供棒状完成了单独检验。分开外周血单个核直通粒棒状(PBMCs)，采用多参数流式直通粒棒状拳法和T直通粒棒状抑止试验检验供棒状当中Treg的阈值、基因同型和功用。用于FlowSOM和CITRUS(聚类检验、表征和重回)完成无督导聚类管理系统性，检验Treg基因同型。

结果：与身心健康供棒状相比，来自慢困难重重棒状的知觉CD4+T直通粒棒状的督导聚类推断，激来生的知觉CD4+ Treg阈值减低，与糖皮质激素诱导的TNFR关的蛋白(GITR)指出减低有关。一名HbA1c下降的病征与困难重重减慢者和归一化的对照四组相比，Treg磬各有完全相同。功用管理系统性说明，与身心健康供棒状相比，来自减慢困难重重棒状的Treg酪氨酸的CD4+效应T直通粒棒状抑止突出受到破坏。展现为对效应CD4+T直通粒棒状CD25和CD134指出的抑止减低。

三幅1 集中的基因同型管理系统性推断，CD4+Treg亚同型在慢困难重重描述符当中减低。由FlowSOM生成的Treg室，涌进在来自所有供棒状的来生CD4+CD45RA -直通粒棒状上。根据标明物指出检验出10个元簇:知觉T直通粒棒状_1;知觉T cell_2;知觉T cell_3;知觉T cell_4;CD49b知觉T直通粒棒状;HLA-DR + GITR +知觉T直通粒棒状;存储器Treg_1;存储器Treg_2;存储器Treg_3;和存储器Treg_4。(a)用于9个完全相同Treg标明生成的10个元簇的MST。每个节点代表一个战略性(100个战略性)，较小的元战略性(10个元战略性)在节点四组周围打磨。每个节点当中的饼三幅指出单个标明的指出级别。(b)每个元聚类的热三幅，以推断整棒状标明指出。(c, d)为HD四组(c)和SP四组(d)生成三幅，以及FlowSOM辨识的每个元簇的覆盖层。(e-l)相对核素为每个metacluster罐直通三幅(核素> 0.05%)确定为HD和SP四组:存储器Treg_2 (e),存储器Treg_3 (f),存储器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +知觉T直通粒棒状(h)、知觉T cell_1(i),知觉T cell_2 (j),知觉T cell_3 (k) n d CD49b知觉T直通粒棒状(l)。深金色左上角代表**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验。此键适用于三幅形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

三幅2 用于CITRUS的预测模同型猜测，Treg阈值的减低是困难重重减慢的标志。这两项关的联(a - f)和玉米管理系统性(g-k)比起SP自发性和归一化的HD自发性在CD4+CD45RA−T直通粒棒状上的关联。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社群的代表性三幅。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3非金属，然后通过HLA-DR和GITR指出完成分开，模拟FlowSOM社群。(b) HD(网纹)和SP(斑点)四组以及供棒状SP 606(深金色)当中CD25+ cd127的阈值核心内容三幅。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+关的联有界的罐直通三幅;(c) HLA-DRloGITR−(存储器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(存储器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(存储器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+存储器T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3指出风力着色，箭头突出的簇被辨识为SP和HD描述符两者之间的完全相同。(j)罐直通三幅推断了在SP(斑点)和HD(灰点)四组当中，CITRUS知觉Treg_3和Treg_4的相对核素(总和)。(k)直方三幅推断每个簇的基因同型(深蓝色)和Treg标明相对指出与氛围指出(金色);上列，存储器Treg_3;下面一行，存储器Treg_4。氛围与所有其他簇当中标明的指出有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验

三幅3 与身心健康献血者相比，困难重重减慢者知觉treg的GITR减低。每个知觉CD4+T直通粒棒状元簇(知觉T直通粒棒状_1;知觉T cell_2;知觉T cell_3;CD49b +知觉T直通粒棒状;HLA-DR + GITR +知觉T直通粒棒状;存储器Treg_2;存储器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)扫描每个指出标明的变异。(a,b)来自HD (a)和S (b)描述符的指出热三幅(sp606不有数在内)。(c,d)知觉Treg_4元簇当中所有HD(红色)、所有SP(金色)和SP 606(深金色)的FlowSOM GITR指出并联，推断直方三幅(c)和核心内容三幅(d)。Wilcoxon配对符号秩和检验，p< 0.07(深金色)所有供棒状有数，p< 0.05(金色)供棒状SP 606和归一化的HD不有数在测试当中。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs当中GITR指出，从这两项关的联，从所有HD(红色)、所有SP(金色)和SP 606(深金色)并联，推断直方三幅(e)和核心内容三幅(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检验

三幅4 来自减慢困难重重的CD4+ treg直通粒棒状控制效应CD4+T直通粒棒状的控制能力减低。SP四组用金色的直通和左上角指出，HD四组用紫色的直通和左上角指出，深金色的直通/左上角指出供棒状sp606。用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T直通粒棒状完成分选。CD4+CD25−(；也者)被标明为CFSE, Treg按判读的总和溶液。用抗CD3 /28微珠增殖直通粒棒状，人才培养3在此之后完成流式直通粒棒状拳法扫描。(a-d)与CD4+；也者相对应的treg人才培养(诱导)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD；也者人才培养。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE抑止总和(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑止总和。用于特点性对照(激来生的叛离直通粒棒状内含treg)计算抑止总和。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差管理系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比起测试

三幅5 效应CD4+T直通粒棒状对减慢困难重重的T直通粒棒状增殖的抑止愈来愈恰当。SP四组用金色的直通和左上角指出，HD四组用紫色的直通和左上角指出，深金色的直通/左上角指出供棒状sp606。用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T直通粒棒状完成分选。CD4+CD25−(；也者)被cfsel标明，treg按判读的总和溶液。用抗CD3 /28微珠增殖直通粒棒状，人才培养3在此之后完成流式直通粒棒状拳法(CD25反染)和直通粒棒状因子管理系统性。HD Treg与HD、SP或sp606；也者协同人才培养。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE抑止总和(b)。(c,d) CD25抑止总和(c)和CD134抑止总和(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共人才培养当中的指出。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差管理系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比起测试

论证：我们得出的论证是，来自减慢困难重重子的增殖知觉CD4+Treg在GITR指出当中受益了扩张和丰富，强调了有利于研究者Treg在1同型高血压高风险个棒状当中的异质性的实质。

译文出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28